透射电镜样品中嵌入的附表
固定和环氧树脂(环氧树脂CY212),透射电镜样品中嵌入的附表1。 在修改后的 Karnovsky固定液固定样品为1 - 1.5小时4 O彗星样本大小取决于。
2。冲洗0.1M磷酸盐缓冲或cacodylate缓冲 (2x2mins)
3。 邮政在1%修正为0.5 - 1.5小时缓冲四氧化锇 4 O
4。冲洗0.1M磷酸盐缓冲或cacodylate缓冲液在室温(2x2mins)脱水
5,50%的酒精3x5mins
75%的酒精3x5mins
95%的酒精3x5mins
100%的酒精3x10mins
6,渗透与中间的解决办法(不是所有样品) -玻璃,而不是塑料。
100%的酒精/环氧丙烷(50:50)3x10mins
100%的环氧丙烷3x10mins
7。Aradite 212树脂渗透。
100%的环氧丙烷/ 一个raldite CY212 (50:50)1小时,与盖关闭(或在室温下过夜)
100% 环氧树脂CY212 2x1hr盖子关闭,(或1x1hr +室温过夜)
8。嵌入样品。
定位样品,并在合适的模具(棺材/嵌入胶囊)和新鲜牢盖嵌入。
在45℃聚合12小时,然后在摄氏60度持续24小时
附注
请记住阅读并签署开始的任何程序之前,所有COSSH的表格。 询问如果你不知道任何事情!
所有步骤必须在通风橱内进行,手套应戴各地。
锇酸,环氧丙烷和环氧丙烷/树脂废物应收集瓶进行安全处置。
对于步骤2到6个加工小瓶应在一个旋转的搅拌机。
它往往是有利于增加与结缔组织含量高,如皮肤,肌腱,软骨,角膜等标本的处理时间 .. 这应该是所有步骤,并在第6步(甚至可以扩展到一个通宵的治疗),特别是为50/50混合。 如果不增加时间,可能会导致不良的浸润块,因此薄弱的部分,将失败下的电子束,甚至是不可能的削减摆在首位。
对于非常紧急的标本处理时间可能会减少,只要组织块是非常小的,而不是“难”组织(见上文)。 聚合可以实现在100℃使用胶囊(在此温度下聚乙烯的熔融),在1个小时。 块必须在水冷却,并在15分钟准备削减。
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